منصة زاجل الإجتماعية

تقليص

مختبرات (أنواع الأوساط الغذائية Media وخصائصها )

تقليص
X
 
  • تصفية - فلترة
  • الوقت
  • عرض
إلغاء تحديد الكل
مشاركات جديدة
  • جمال عبد العظيم
    مشرف عالم الصناعات الغذائية
    • Nov 2009
    • 293

    مختبرات (أنواع الأوساط الغذائية Media وخصائصها )

    أنواع الأوساط الغذائية Media وخصائصها




    1- Chocolate Agar
    • بيئة غنية Enriched Media تنمو عليها أغلب البكتيريا
    • تحتوي على عوامل X و V الناتجة من تفجر كريات الدم الحمراء RBCs والتي يمكن من خلالها نمو Heamophilus spp و Neisseriae والتي تعتبر هذه الأنواع من البكتيريا صعبة النمو Fastidious .






    2- Blood Agar
    • بيئة غنية Enriched Media تنمو عليها معظم البكتيريا
    • بيئة تفريقية Differential بين أنواع البكتيريا المحللة للدم عن طريق التحلل الكامل للدم Beta hemolytic مثل Sterpt. Pyogenes و Sterpt. Agalactiae أو التحلل الجزئي للدم مثل Alpha hemolytic مثل Sterpt. Pneumonia و Sterpt. Viridans أو عدم التحلل للدم Non hemolytic مثل Sterpt. Faecalis و Sterpt. Bovis .






    3- MacConkey Agar
    • بيئة تفريقية للتفريق بين البكتيريا المخمرة للاكتوز Lactose fermenting والتي تأخذ اللون الأحمر مثل E.coli و Klebsiella و Enterobacter ، وبين البكتيريا الغير مخمرة للاكتوز Non-lactose fermenting والتي ليس لها لون (شفاف) مثل Proteus و Salmonella و Shigella .
    • تحتوي على Crystal violet أو Bile Salts بحيث تسمح للبكتيريا السالبة لصبغة جرام بالنمو وتثبط نمو الموجبة لصبغة جرام







    4- (stine Lactose electrolyte deficient (CLED
    • وسط لزراعة عينات الجهاز البولي .
    • بيئة تفريقية للتفريق بين البكتيريا المخمرة للاكتوز Lactose fermenting والتي تأخذ اللون الأصفر مثل E.coli ، وبين البكتيريا الغير مخمرة للاكتوز Non-lactose fermenting والتي ليس لها لون (شفاف) مثلAcnitobacter بسبب وجود الكاشف Bromo-thymol blue .
    • لها نفس وظيفة الـ MacConkey Agar







    5- (Xylose lysine deoxycholate (XLD
    • بيئة اختيارية تفريقية لـ Salmonella و Shigella حيث أن الـ Salmonella تأخذ اللون الوردي لوجود Phenol Red مع وجود لون أسود في المركز نتيجة تحلل مواد موجودة في البيئة ينتج عنها غاز H2S والـ Shigella تأخذ مستعمراتها اللون الوردي فقط .






    6- Salmonella Agar (S.S Agar) Shigella
    • بيئة اختيارية لا تسمح بنمو البكتيريا الموجبة لصبغة جرام وبعض البكتيريا السالبة لصبغة جرام ماعدا Salmonella Shigella & بسبب وجود Na-citrate & bile salts
    • بيئة تفريقية لـ Salmonella و Shigella حيث أن الـ Salmonella تأخذ لون البيئة (شفاف) مع وجود لون أسود في المركز نتيجة تحلل مواد موجودة في البيئة ينتج عنها غاز H2S والـ Shigella تأخذ مستعمراتها لون الوسط(شفاف) .






    7- (Mannitol salt Agar (MSA
    • بيئة تفريقية للتفريق بين Staphylococcus species و Staphylococcus aureus التي تخمر المانيتول بتأثيرها على لون الكاشف Phenol Red وتعطي اللون الأصفر بينما الـ Staph. الأخرى لا تخمر المانيتول .
    • بيئة اختيارية لأن تركيز الأملاح العالي (Nacl 7.5%) الموجود فيه يثبط نمو الميكروبات الأخرى .







    8- (Thiosulphate citrate bile salt Agar (TCBS
    • بيئة اختيارية لعزل الكوليرا Vibrio Cholerae
    • تثبط نمو معظم الـ Enterbacteria والبكتيريا الموجبة لصبغة جرام بسبب احتوائها على مواد مثبطة وكذلك قلوية PH الوسط العالية.







    9- Mueller Hinton Agar
    • بيئة ضعيفة المواد الغذائية .
    • مناسبة لعمل اختبارات الحساسية لأنها لا تحتوي على أية نسب من المواد الكيميائية بحيث لا تتفاعل مع المضادات الحيوية .





    10- Bile Esculine
    • بيئة تفريقية بين الأنواع المختلفة من الـ Streptococcus و الـ Enterococcus (Strept. Faecalis) التي تفرز عند نموها على هذه البيئة إنزيماً يفكك مادة الأسكولين فيتشكل مركب أسكولتين والذي يتحد مع أيونات الحديد الموجود بالبيئة على شكل سترات الحديد ويتكون مركب اسود يدل على وجود Enterococcus
    • أيضاً وجود (4% أملاح الصفراء) يثبط الكثير من البكتيريا دون أن يؤثر على نمو Enterococcus .





    11- (Sabouroud Dextrose Agar (SDA
    • بيئة اختيارية لنمو الفطريات .
    • الـ PH حامضي لذلك لا تسمح بنمو البكتيريا .






    جدول يوضح العينات الطبية والأوساط المفضلة لزراعتها كما يُعمل به في كثير من المستشفيات

    This image has been resized. Click this bar to view the full image. The original image is sized 900x1200.



    This image has been resized. Click this bar to view the full image. The original image is sized 900x1200.





    ................................... ............... ................................... .........





    Mac Conkey Agar
    Selective medium
    "stool , sputum , Eye , Ear , wound , vagina sample "
    selective for G -ve bacteria and also Group D in G+ve bacteria can grows on this media
    and differential between lactose fermentation bacteria and non lactose fermentation bacteria

    CLED Agar
    Used on Urine samples
    for G+Ve and G-Ve bacteria
    properties:- Inhibition Proteus Swarming Species on this media like Mac Conkey media
    CLED in the upper part of the media which seen in the picture below
    and the other one is Horse blood agar

    XLD medium
    Used on stool sample
    XLD selective media for G -ve bacteria
    and differential for lactose ferment and non lactose ferment

    Chocolate Agar
    for Haemophilus & Neissria
    and also another bacteria which grow in blood agar can grow in this agar easily
    " sputum , Eye , Ear , blood , nasal , csf sample "


    Blood Agar
    "sputum , Eye , Ear , nasal , blood , wound , vagina"
    Most of the bacteria can grow in this media
    and we dont use this media in stool sample

    Manitol salt Agar
    Used in suspected (Nosocomial infection) " MRSA" (Eye , nasal , throat samples )

    Mueller Hinton agar
    Used for sensitivity tests

    DNase Agar
    Biochemical test
    used for differentiate between Staph.aureus and Staph species


    T.C.B.S medium
    for Vibrio Species
    The high of PH in this media allows growing of vibrio SSP


    Thyer Martin Medium
    For Neisseria gonorrehea
    samples from vagina and penis
    and in uncommon area like oral cavity and anal canal




    ................................... ............... ................................... ..........



    Sterilization of Media
    تعقيم الأوساط الغذائية



    *All media are sterilized by moist heat only; there is no dry heat sterilization (160c/2hours) or (170c/1.5 hour).
    *The most common sterilization of media by autoclave (121c/15minute).
    Autoclave is part of moist heat sterilization.
    *Sterilization by inspissations (80c) for example: L J media.
    *membrane filtration for thermolabile for example: Christian media for urease test.
    *most of the selective media are sterilized by boiling (No autoclave)





    الطرق التحليليلة للاغذية فهى كالاتى

    تحضير العينة

    يتم تحضير العينة باخذ 10 الى 11 جرام من العينة واضافة 100 مم ماء ببتون ثم توضع فى جهاز لمزجهما معا


    هناك طريقتيين

    الاولى وتدعى MPN وهذه العملية تتم للكشف عن ميكروبات السلبية للجرام باستخدام وسط بيئى او ميديا وتدعى LTP وهذه من انواع الميديا السائلة توضع فى انابييب ويوضع مع الانبوبة المعكوسة او انبوبة درهم
    فى حالة تكوين غاز تصبح موجبة واذالم يتكون تصبح سالبة ولكن توضع العينان بتخفيفات معينة فى الانابييب وتحضن لمدة 48 ساعة فى درجة 35 درجة ثم تفحص للايجابية عن طريق تكون الغاز وبعد ذلك نقوم بعملية التاكد او CONFERMATION للتعرف على TOTAL COLIFORM و FECAL COLIFORM

    الطريقة الثانية وهى عدد البكتريا او STANDARD PLATE COUNT

    وفى هذه الطريقة يتم زراعة البكتريا على اطباق على نوع من انواع الميديا البسيطة SIMPLE MEDIA وذلك لكى تهىء وسط جيدا لنمو جميع انواع البكتيريا وتحضينها لمدة 48 ساعة فى درجة حرارة 35 ويتم عد ال COLONIS التى ظهرت على الاطباق بجهاز العد

    ملحوظة يعتمد تخفيف العينة على نوعها العينات المطبوخة يكون تخفيفها اقل من العينات التى لم تتعرض للحرارة مثل السلاطة يكون تخفيفها اعلى لان بها كمية بكتيرا كثيرة لذلك يجب ان يكون تخفيفها عاالى لكى نستطيع عد البكتريا على اطباق العد

    الاختبارات حسب طرق معترف بها مثل bam او AOAC او بروسيجرات Iso اما بنسبة لاوساط الزرعية فان كل بروسيجر يستخدم فيه نوع معين من Media مثلا في BAM لتعداد Molds&Yeast يستخدم DRBC agar اما في ISO يستخدم YGC.
    اما بنسبة للفحوصات فهناك اجهزة جديدة وعالية الدقة يستخدم في هذا المجال مثل PCR وطرق سريعة rapid methods
    اما بنسبة للفحوصات اما يكون الهدف Enumaration مثل تعداد Mold &yeast او TVCاو Sulphute reducing bacteria الخ .او deTECTION مثل Salmonella او Listeria الخ اذا كان لديك اي سؤال حول ايى فحص مايكروبي اواي media culture


    مكونات الأوساط الغذائية والمواد اللازمة لإجراء التجارب
    أولاً: مكونات الأوساط الغذائية:

    الوسط الغذائي الآجار المغذي : Nutrient agar
    1- ببتون Peptone 6 جم/ل
    2- مستخلص خميرة Yeast extract 1 جم/ل
    3- مستخلص لحم Beef extract 2 جم/ل
    4- كلوريد الصوديوم NaCl 5 جم /ل
    5- آجار Agar 17 جم/ل
    تذاب هذه المواد في لتر ماء مقطر. D.water 1 لتر

    بيئة المرق المغذيNutrient broth :
    1- ببتون 5 جم/ل
    2- مستخلص لحم 3 جم/ل
    3- قد يضاف كلوريد الصوديوم 0.5 جم/ل
    تذاب هذه الكميات في لتر من الماء المقطر.

    بيئة شابكس دوكس آجارChabex dox agar :
    1- ملح كلوريد البوتاسيوم KCl 0.5 جم/ل
    2- ملح نترات الصوديوم Na2NO3 2 جم/ل
    3- كبريتات المغنيسيوم MgSO4 0.5 جم/ل
    4- فوسفات ثنائي هيدروجين البوتاس KH2PO4 1 جم/ل
    5- سكروز 10 جم/ل
    6- آجــار 17 جم/ل
    7- روز بنغال(يستعمل كمضاد لمنع نمو البكتيريا) 10 مل/ل
    تضاف هذه الكميات إلى لتر من الماء المقطر.
    قد يضاف كبريتات الحديدوز بنسبة 0.01 جم/ ل

    بيئة مرق تخمر اللاكتوز Lactose fermentation broth :
    1- مستخلص لحم 3 جرام
    2- ببتون 5 جرام
    3- لاكتوز 5 جرام
    4- بروموثيمول الأزرق 0.016
    5- ماء مقطر 1 لتر
    تعقم البيئة الغذائية تعقيم متقطع

    بيئة الجيلاتين المغذي Nutrient gelatin :
    مستخلص لحم 3 جرام
    ببتون 5 جرام
    جيلاتين 150 جرام
    ماء مقطر 1 لتر
    تعقم البيئة تعقيما متقطعا .
    مرق التربتونTrypton broth :
    تربتون 10 جرام
    مستخلص لحم 3 جرام
    ماء مقطر 1 لتر

    بيئة الكريستال البنفسجي Crystal violet agar :
    تحضر بيئة الآجار المغذي كما سبق ثم يضاف ملل من صبغة الكريستال البنفسجي للوسط الغذائي ثم تعقم البيئة وتحضر صبغة الكريستال البنفسجي كما يلي :
    بلورات كريستال بنفسجي 1 جرام
    ماء مقطر 100 مل

    بيئـة الطحالب:

    نترات الكالسيوم Ca(NO3)2 2 جم
    كلوريد البوتاسيوم KCl 0.5 جم
    كبريتات المغنيسيوم المائي MgSO4 0.5 جم
    فوسفات أحادي البوتاسيوم KH2PO4 0.5 جم
    ماء الصنبور 1000 ملل
    ** نخفف جزء واحد من هذا المحلول مع خمسة أجزاء من ماء الصنبور.
    كلوريد الحديد المائي FeCl3.6H2O 0.01 جم

    بيئة آجار أندو Endo agar :
    ببتون 10 جرام
    لاكتوز 10 جرام
    بوتاسيوم فوسفات الهيدروجين K2HPO4 3.5 جرام
    كبريتيد الصوديوم 2.5 جرام
    فوكسين قاعدي 0.5 جرام
    آجار 15 جرام
    ماء مقطر 1 لتر

    بيئة آجار ايوسين أزرق اميثيلين ( EMB ) Eosin Methylene bhue agar :
    ببتون Peptone 10 جرام
    لاكتوز Lactose 5 جرام
    سكروز Sucrose 5 جرام
    فوسفات ثنائي البوتاسيوم Dipotassium phosphate 2 جرام
    ايوسينY Eosin Y 0.4 جرام
    أزرق الميثيلين Methylene blue 0.65 جم
    آجار Agar 13.5 جرام
    ماء مقطر D.water 1 لتر
    يمكن زيادة تركيز الآجار في البيئة إلى 5 % ( أي إضافة 17 جم من الآجار بدل الكمية السابقة ) لمنع انتشار Proteus .

    بيئة آجار النشا Starch agar :
    تربتون 10 جرام
    مستخلص خميرة 10 جرام
    بوتاسيوم فوسفات الهيدروجين 5 جرام
    نشا ذائب 3 جرام
    آجار 15 جرام
    ماء مقطر 1 لتر
    يضاف النشا إلى كمية ماء قليلة ويتم التسخين مع التقليب المستمر حتى يذوب النشا , يستمر التسخين حتى الغليان وبسرعة يتم إضافة النشا الذائب إلى بقية المكونات .

    اختبار الاندول , أحمر الميثايل , فوكس بروسكاور , الستراتIMVIC :
    اختبار الاندول
    تربتون 10 جرام
    مستخلص خميرة 5 جرام
    بوتاسيوم فوسفات الهيدروجين 5 جرام
    جلوكوز 1 جرام

    بعد الزراعة والتحضين يتم استخدام طريقة كوفاكس Kovac`s
    باضافة 0.3 مل من محلول كوفاكس إلى 6 مل من المزرعة السائلة ثم اخلطهما جيدا فنلاحظ انفصال طبقة كحولية فوق المخلوط ويتحول لون هذه الطبقة إلى اللون الأحمر بعد عدة دقائق في حال وجود الإندول .
    ويتركب محلول كوفاكس من :
    بارا داي ميثايل امينوبنزالدهيد 5 جرام
    كحول أمايل أو بيوتايل 75 مل
    حمض هيدروكلوريك مركز 25 مل
    تذاب المادة الأولى في الكحول ثم يضاف الحمض بحذر بعد ذلك .

    اختبار أحمر الميثايل وفوكس بروسكاور Methyl red voges proskauer medium :
    جلوكوز 5 جرام
    بروتيوز ببتون 5 جرام
    بوتاسيوم فوسفات الهيدروجين 5 جرام
    ماء مقطر 1 لتر
    Ph = 6.9
    يمكن استخدام الببتون باضافة 7 جرام إلى البيئة بدلا من بروتيوز البتون وإضافة الدكستروز 5 جم بدلاً من الجلوكوز . ويستخدم هذا الوسط للإختبارات الكيميائية المفرقة للبكتيريا المعوية.


    بيئة آجار الجلوكوز Glucose agar :
    1- مستخلص لحم 3 جم
    2- ببتون 5 جم
    3- جلوكوز 10 جم
    4- آجار 17 جم
    5- ماء مقطر 1 لتر


    بيئة آجار دكستروز البطاطس ( PDA ):
    1- مستخلص مائي لـ 200 جم من البطاطس ( يحضر بطهي البطاطس ثم هرسه وتحويله إلى سائل كثيف .
    2- دكستروز 20 جم
    3- آجار 20 جم
    4- ماء مقطر 1 لتر

    بيئة آجار أحمر الكونغو :
    مانيتول 10 جم
    فوسفات ثنائي البوتاسيوم 0.5 جم
    كبريتات مغنيسيوم 0.2 جم
    كربونات كالسيوم 3 جم
    كلوريد صوديوم 0.1 جم
    مستخلص خميرة 1 جم
    أحمر الكونغو ( 1جم تذاب في 400 مل ) 10 مل
    آجار 20 جم
    تذاب الكميات في 1 لتر

    بيئة أومليانسكي :
    كبريتات أمونيوم 1 جم
    فوسفات ثنائي البوتاسيوم 1 جم
    كبريتات مغنيسيوم 0.5 جم
    كربونات كالسيوم 2 جم
    كلوريد صوديوم 0.1 جم
    ماء مقطر 1 لتر

    بيئة قاعدة المرق القرمزي :
    1- ببتون 10 جم
    2- مستخلص لحم 1 جم
    3- كلوريد صوديوم 5 جم
    4- برومو كريزول الأرجواني 0.016 جم
    5- ماء مقطر 1 لتر


    بيئة دايبوز :
    1- نترات صوديوم 0.5 جم
    2- فوسفات ثنائي البوتاسيوم 1 جم
    3- كبريتات مغنيسيوم 0.5 جم
    4- كلوريد البوتاسيوم 0.5 جم
    5- كبريتات حديديك 0.001 جم
    6- ماء مقطر 1 لتر


    بيئة كليجلر Kligler agar media :
    1- مستخلص لحم 3 جم
    2- مستخلص خميرة 3 جم
    3- ببتون 15 جم
    4- بروتيوز ببتون 5 جم
    5- لاكتوز 10 جم
    6- جلوكوز 1 جم
    7- كبريتات حديدوز 0.2 جم
    8- كلوريد صوديوم 5 جم
    9- ثيوكبريتات الصوديوم 0.3 جم
    10- آجار 15 جم
    11- أحمر فينول 0.024 جم
    12- ماء مقطر 1 لتر

    Salmonella Shigella agar ( S.S.A )

    1- مستخلص لحم 5 جم
    3- ببتون 5 جم
    4- أملاح الصفراء Bile salt mixture 8.5 جم
    5- لاكتوز 10 جم
    6- سترات الصوديوم 8.5 جم
    7- سترات الحديدوز 1 جم
    8- أخضر لامع BRILLIANT GREEN 0.33 جم
    9- ثيوكبريتات الصوديوم Sodium thiosulfate 8.5 جم
    10- آجار 15 جم
    11- أحمر فينول Nutral red 0.024 جم
    12- ماء مقطر 1 لتر

    أذب بالغليان ( لاتستعمل الأوتوكليف ) وتستعمل هذه البيئة لعزل العصيات المعوية الضارة وتمنع نمو بكتيريا Coli form كما تميز بين الأنواع المخمرة للاكتوز وغير المخمرة .

    Tetrathionate broth

    Proteose peptone 5 gm
    Bile salt 1 gm
    Calcium carbonate 10 gm
    Sodium thiosulphate 30 gm
    D.water 1000 ml
    وزع 10 مل في كل أنبوب ثم سخن حتى الغليان وقبل الإستعمال يضاف 0.2 مل من محلول اليود إلى كل أنبوب و المحضر كما يلي ( 6 جم يود + 5 جم يوديد البوتاسيوم + 20 مل ماء مقطر ) .
    وتستخدم هذه البيئة لعزل السالمونيلا ماعدا Salmonella typhi .

    بيئة لبن البروموكريزول الأرجواني :
    1- لبن فرز طازج 100 مل
    2- بروموكريزول الأرجواني 0.016 جم
    تعقم البيئة تعقيماً متقطعاً

    مرق دكستروز تريبتون بروموكريزول الأرجواني :
    1- تريبتون 10 جم
    2- دكستروز 5 جم
    3- بروموكريزول الأرجواني 0.04 جم
    4- ماء مقطر 1 لتر


    بيئة لبن تباع الشمس :
    يحضر بإضافة كمية كافية من محلول مائي مشبع من تباع الشمس إلى لبن فرز طازج حتى يصبح اللون أزرق واضح ثم تعقم البيئة تعقيماً متقطعاً .


    بيئة مرق النترات Nitrate broth :
    1- مستخلص لحم 3 جم
    2- ببتون 5 جم
    3- نترات بوتاسيوم 1 جم
    4- ماء مقطر 1 لتر
    أو يمكن استخدام التركيبة التالية لفحص اختزال النترات

    Tryptone 5 gm
    Neopeptone 5 gm
    D.water 1000 ml
    Potassium nitrate reagent 1 gm
    Glucose 0.1 gm
    قبل إضافة المادتين الأخيرتين ( الجلوكوز ونترات البوتاسيوم ) تغلى المواد السابقة واجعل ال ph = 7.3 . ثم توزع 5ملل في أنابيب ثم تعقم لمدة 15 دقيقة .
    ويتكون محلول الفحص للنترات من
    محلول A : أذب 8 جم من Sulphanilic acid في لتر من 5N acetic acid
    محلول B : أذب 5 جم من α-naphthylamine في لتر من 5N acetic acid
    Phenylalanin agar

    Yeast extract 3 gm
    DL-phenylalanin 2 gm
    Disodium phosphate 1 gm
    NaCl 5 gm
    Agar 13 gm
    D.water 1000 ml
    وزع 3 مل في كل أنبوب ثم عقم عند 121 ْم لمدة 10 دقائق ثم اتركها لتصلب لعمل أنابيب مائلة slant تستخدم هذه البيئة للتأكد من قدرة البكتيريا على إزالة مجموعة الأمين من الحامض الأميني فينيل ألانين وتكوين Phenylpyruvate .

    Sabouraud dextrose agar ( SDA )
    دكستروز 40 جم
    ببتون 10 جم
    آجار 15 جم
    ماء مقطر 1 لتر
    PH 5.4

    ويمكن استخدام المكونات الجاهزة كما يلي :
    Sabouraud dextrose agar 32.5 gm
    Agar 2.5 gm
    D.water 500 ml
    تذاب هذه المواد وتغلى للتجانس ثم توزع في أنابيب ثم تعقم وهي بوضع مائل لعمل Slant . ويمكن إضافة المضادات الحيوية لها بعد التعقيم . وتستعمل هذه البيئة لتنمية الفطريات . كما يمكن استخدام سكر الجلوكوز أو المالتوز.




    بيئة آجار سترات الحديديك ( الكشف عن انتاج كبريتيد الهيدروجين )
    1- بروتيوز ببتون 2 جم
    2- فوسفات ثنائي البوتاسيوم 0.1 جم
    3- سترات الحديديك 0.05 جم
    4- آجار 15 جم
    5- ماء مقطر 1 لتر

    Desoxycholate agar

    Peptone 10 gm
    Lactose 10 gm
    Na.citrate 1 gm
    Ferric citrate 1 gm
    NaCl 5 gm
    Dipotassium phosphate 2 gm
    Na-desoxycholate 1 gm
    Agar 16 gm
    Neutral red 0.033 gm
    d.water 1000 ml

    تستعمل هذه البيئة لعزل العصويات المعوية السالبة لجرام وللتمييز بين البكتيريا المخمرة لسكر اللاكتوز من غير المخمرة .

    Desoxycholate citrate agar ( D.C.A )

    Meat infusion form 350 gm
    Peptone 10 gm
    Lactose 10 gm
    Na.citrate 20 gm
    Ferric citrate 1 gm
    Na-desoxycholate 5 gm
    Agar 16 gm
    Neutral red 0.02 gm
    d.water 1000 ml
    ph = 7.3
    تستعمل هذه البيئة لعزل السالمونيلا والشايجيلا من البراز أو أي عينة أخرى .
    كما يمكن تحضيره بالطريقة التالية :
    Meat extract 20 gm
    Pepton 20 gm
    Lactose 40 gm
    Nutral red 0.1 gm
    Agar 90 gm
    d.water 4 L
    يضاف لكل 100 ملل من المكونات السابقة 5 مل من محلول ( أ ) المكون من :
    17 % سترات الصوديوم و 17 % ثيوسلفات الصوديوم و 2 % سترات الأمونيوم والحديديك. ثم يضاف 5 ملل من المحلول ( ب ) المكون من 10 % ديسوكسيكولات الصوديوم . وتذاب المكونات بالتسخين على اللهب ولا يعقم بالأوتوكليف ولايتم إذابته مرة أخرى إذا حدث له تصلب .
    ويستخدم هذا الوسط لعزل السالمونيلا .

    بيئة مرق اليوريا Urea broth :
    1- فوسفات ثنائي البوتاسيوم 1 جم
    2- كلوريد كالسيوم 0.1 جم
    3- كبريتات مغنيسيوم 0.3 جم
    4- كلوريد صوديوم 0.1 جم
    5- كلوريد حديديك 0.01 جم
    6- مستخلص لحم 5 جم
    7- يوريا 20 جم
    8- ماء مقطر 1 لتر
    تذاب اليوريا في 50 مل ماء وتعقم بالترشيح ثم تضاف إلى باقي مكونات البيئة بعد تعقيمها .
    كما يمكن تحضير بيئة آجار اليوريا urea agar المستخدمة في اختبار إنزيم اليورييز كما يلي :
    Peptone 1 gm
    Glucose 1 gm
    NaCl 5 gm
    Mono-K-phosphate 2 gm
    Phenol red 0.012 gm
    Agar 20 gm
    D.water 1000 ml
    Ph = 6.9
    تحضر البيئة الأساس وتعقم بالأوتوكلاف لمدة 15 دقيقية في قارورة تحتوي على 100 – 200 مل ثم تحفظ لحين الحاجة .
    تحضر اليوريا 29 % محلول اليوريا المعقم بالترشيح ويضاف منه 10 مل من اليوريا / 100 مل من البيئة الأساس المذابة والمبردة لدرجة 50 ْم لعدم تكسر اليوريا بالحرارة العالية ثم توزع بيئة اليوريا في أنابيب بمقدار 3 مل لكل أنبوب وتبرد بشكل مائل حتى تتصلب .
    تستعمل هذه البيئة لمعرفة البكتيريا المنتجة لإنزيم اليورييز مثل proteus و Cryptococcus كما يمكن لبعض بكتيريا Coli form إنتاج هذا الإنزيم وتمييزها عن Salmonella , Shigella غير المنتجة للإنزيم .

    T.C.B.S ( Thiosulphate citrate bile salt )

    Peptone from casien 5 gm
    Peptone from meat 5 gm
    Yeast extract 5 gm
    Sodium citrate 10 gm
    Sodium tiosulfate 10 gm
    Oxgall 5 gm
    Sodium choclate 3 gm
    Sucrose 20 gm
    NaCl 10 gm
    Iron III citrate 1 gm
    Thymol blue 0.04 gm
    Bromothymol blue 0.04 gm
    Agar 14 gm
    Ph = 8.8
    يستعمل هذا الوسط لتنمية بكتيريا الكوليرا Vibreo cholera.

    بيئة مرق ببتون أملاح الصفراء واللاكتوز ودليل الأخضر الزاهي :
    1- مستخلص أملاح الصفراء لثور 30 جم
    2- لاكتوز 5 جم
    3- ببتون 20 جم
    4- كلوريد الصوديوم 5 جم
    5- أخضر زاهي 1% 2 مل
    6- ماء مقطر 1 لتر


    مرق خلاصة المالت ( الشعير ) Malt extract broth :
    1- مستخلص المالت 20 جم
    2- ماء مقطر 1 لتر

    يستخدم كوسط عام لنمو الفطريات وخاصة الخمائر ويمكن استخدامه كوسط صلب بإضافة 20 جم من الآجار .

    بيئة آجار اختبار الحركة Motility test agar
    1- تربتوز 10 جم
    2- كلوريد صوديوم 5 جم
    3- آجار 5 جم
    4- ماء مقطر 1 لتر

    بيئة آجار الثيوجليكولات Thioglycolate medium
    1- ثيوجليكولات الصوديوم 0.5 جم
    2- آجار 20 جم
    3- ماء مقطر 1 لتر
    كما يمكن استخدام التركيبة التالية :
    ببتون 20 جم
    ل- سيستين L-cystine 0.25 جم
    جلوكوز Glocose 6 جم
    كلوريد الصوديوم 2.5 جم
    كبريتات الصوديوم Na-sulfate 0.5 جم
    كبريتيد الصوديوم Na-sulfite 0.1 جم
    آجار 0.7 جم
    ماء مقطر 1 لتر
    Ph = 7.2

    Triple sugar iron agar ( T.S.I )

    Peptone 20 gm
    NaCl 5 gm
    Lactose 10 gm
    Sucrose 10 gm
    Glucose 1 gm
    Ferrous ammonium sulphate 0.2 gm
    Na-thiosulphate 0.2 gm
    Phenol red 0.025 gm
    Agar 13 gm
    D.water 1000 ml
    Ph = 7.3
    تستخدم هذه البيئة لمعرفة تخمر السكريات وإنتاج غاز كبريتيد الهيدروجين H2S للتحقق من وجود العصويات السالبة لصبغة جرام .



    بيئة آجار خلاصة الخميرة
    1- فوسفات ثنائي البوتاسيوم 2 جم
    2- خلاصة اللحم 3 جم
    3- خلاصة الخميرة 2 جم
    4- تربتون 5 جم
    5- جلوكوز 10 جم
    6- آجار 15 جم
    7- ماء مقطر 1 لتر


    بيئة آجار الدم Blood agar
    1- مستخلص لحم Beef extract 3 جم
    2- تربتوز Treptose 10 جم
    3- كلوريد صوديوم NaCl 5 جم
    4- آجار Agar 15 جم
    5- ماء مقطر D.water 1 لتر
    قبل صب البيئة في الأطباق يضاف 5 % دم معقم .
    أو يمكن استخدام blood agar base medium ( trypticase soy agar ) 500 ملل يضاف لها دم معقم بالترشيح 20 ملل ( دم أغنام أو خيول )
    تعقم بيئة أساس الدم كالمعتاد وتترك لتبرد عند 48 ْم ثم يضاف لها الدم المعقم ويخلط جيداًثم تصب في أطباق وتبرد ويفضل استخدامها قبل أسبوع مع الحفظ الجيد في الثلاجة .
    وتعتبر هذه البيئة غنية تشجع نمو البكتيريا ذات الإحتياجات الخاصة . كما يستخدم للتفريق بين البكتيريا المحللة للدم وغير المحللة .
    Chocolate agar

    تحضر بنفس كميات بيئة آجار الدم مع ملاحظة ما يلي :
    بعد تعقيم بيئة blood agar يضاف لها الدم ثم يسخن على اللهب حتى الغليان فيتحول لونها للون البني ( تسخن الكمية على اللهب حتى الغليان ولمدة دقيقة واحدة لتتكسر مكونات خلايا الدم الحمراء وينطلق الهيموجلوبين فيتحول اللون للبني ) .
    ثم تصب الأطباق وتبرد وتحفظ في الثلاجة .

    Thayer-martin agar

    تستعمل هذه البيئة لتنمية بكتيريا Neisseria meningitidis , Neisseria gonorrhoeae وتحضر كما تحضر chocolate agar إلا أنه يضاف لها مضادات حيوية تساعد في قتل الميكروبات الملوثة للعينة الطبية المشتبه وجود بكتيريا Neisseria فيها .





    بيئة مرق اختزال الكبريتات
    1- كبريتات الأمونيوم 2 جم
    2- كبريتات الحديدوز 0.01 جم
    3- فوسفات ثنائي البوتاسيوم 0.5 جم
    4- لكتات الصوديوم 5 جم
    5- ماء مقطر 1 لتر

    بيئة مرق النترات
    1- ببتون خالي من النترات 1 جم
    2- كلوريد الصوديوم 0.5 جم
    3- نترات البوتاسيوم 0.5 جم
    4- ماء مقطر 1 لتر

    بيئة سليولوز الببتون
    1- فوسفات ثنائي الأمونيوم 2 جم
    2- فوسفات أحادي البوتاسيوم 1 جم
    3- كبريتات المغنيسيوم 0.3 جم
    4- كلوريد الكالسيوم 0.4 جم
    5- كلوريد الحديديك 0.01 جم
    6- كربونات الكالسيوم 3 جم
    7- ببتون 5 جم
    يضاف للبيئة قصاصات ورق ترشيح .

    بيئة بورديت جينجس Boredt -gengous medium

    مستخلص البطاطس Poteto infusion form 125 جم
    NaCl 5.5 جم
    آجار 20 جم
    ماء مقطر 1 لتر
    تعقم هذه البيئة كالمعتاد ثم تبرد عند 50 ْم ثم يضاف لها 15 – 20 % دم معقم وتستعمل هذه البيئة لتنمية بكتيريا Borditella pertussis .

    Brain infusion broth

    Calf brain infusion 200 gm
    Beef infusion 250 gm
    Proteose peptone 10 gm
    Dextrose 2 gm
    NaCl 5 gm
    Na2PO4 2.5 gm
    D.water 100 ml
    Ph = 7.4
    تستعمل هذه البيئة لتنمية Pneumococcus لإجراء اختبار الذوبان في أملاح الصفراء
    Bile solubility test .

    مرق السيلينايت Selenite broth
    Anhydrous sodium hydrogen selenite 4 gm
    Disodium hydrogen phosphate 9.5 gm
    Sodium hydrogen phosphate 0.5 gm
    Pepton 5 gm
    Lactose 4 gm
    d.water 1 L
    يعقم في حمام مائي ولا يستخدم الأوتوكليف ويستخدم هذا الوسط لعزل السالمونيلا من العينات الملوثة من البراو والبول للقضاء على البكتيريا الملوثة للعينة .



    Brilliant green agar

    Yeast extract 3 gm
    Proteose peptone NO.3 10 gm
    NaCl 5 gm
    Lactose 10 gm
    Sacchrose 10 gm
    Phenol red 0.08 gm
    Brilliant green 0.125 gm
    Agar 20 gm
    D.water 1000 ml
    p.h = 6.9
    تستعمل هذه البيئة لتنمية بكتيريا Salmonella ماعدا Salmonella typhi ولا تنمو بكتيريا Shigella على هذه البيئة .

    بيئة سيمون Simmon citrate agar
    كبريتات المغنيسيوم Magnesium sulfate 0.2 جم
    فوسفات الأمونيوم ثنائي الهيدروجين Ammonium phosphate hidrogen 0.2 جم
    فوسفات الأمونيوم والصوديوم Ammonium sodium phosphate 0.8 جم
    سترات الصوديوم الثلاثية Sodium citrate 2 جم
    كلوريد الصوديوم Sodium chloride 5 جم
    صبغة أزرق بروموثيمول Bromothymol blue 0.08 جم
    آجار Agar 15 جم
    ماء مقطر D.water 1 لتر
    PH 6.9
    يستخدم هذا الوسط للتمييز بين البكتيريا المعوية من حيث استخدام السترات كمصدر للكربون فيحدث تغير للصبغة المضافة في البيئة .
    كما يمكن تحضيرها كما يلي :
    اختبار السترات Citrate agar :
    فوسفات أمونيوم NH4-hydrogen phosphate 1 جرام
    فوسفات أحادي البوتاسيوم 1 جرام
    كبريتات مغنيسيوم Magnesium sulfate 0.2 جرام
    سترات صوديوم Sodium citrate 2 جرام
    Bromothymol blue 0.08 جم
    NaCl 5 جم
    ماء مقطر 1 لتر
    آجار Agar 20 جم
    Ph = 6.9
    يمكن استخدام هذه البيئة سائلة بدون إضافة الآجار وتستخدم للتحقق من استخدام البكتيريا للسترات كمصدر للكربون .

    Loffler coagulated serum medium

    أضف ثلاث وحدات من مصل الحصان إلى وحدة واحدة من 1% جلوكوز ثم ضع الخليط في أنبوب وسخن لمدة ساعتين عند 75 – 85 ْم ( كرر عملية التسخين 3 أيام متتالية ) ثم عقم بالأوتوكليف لمدة 15 دقيقة حتى تتجلط البيئة .
    أخرج الهواء بالتدريج حتى تحافظ على الضغط داخل الجهاز ثم عقم بالأوتوكليف مرة أخرى عند 121 ْم لمدة 15 – 20 دقيقة .

    Lowenstein-jensen medium ( L.J )

    Salt solution
    Monopotassium phosphate 2.4 gm
    Magnesium sulfate 7H2O 0.24 gm
    Magnesium citrate 0.6 gm
    Asparagin 3.6 gm
    Glycerol reagent grade 1 12 ml
    D.water 600 ml
    Poteto flour 30 gm
    Homogenized whole egg 1000 ml
    Malachite green 2% aqueous 20 ml

    أضف مسحوق البطاطس إلى قارورة المحلول الملحي وعقم بالأوتوكليف لمدة 30 دقيقة ثم اغسل بيض طازج بعمر أقل من أسبوع بـ 5 % محلول صابون وضع البيض فيه لمدة 30 دقيقة ثم ضعها في الماء الجاري حتى تصبح صافية ثم اغمرها في 70 % كحول لمدة 15 دقيقة ثم اكسرها وضعها في قارورة معقمة واخلطها جيداً حتى تتجانس مكوناتها ثم صفي المحلول بشاش معقم أربع طبقات . ثم أضف لتراً من خليط البيض المتجانس إلى القارورة المحتوية على المحلول الملحي ومحلول البطاطس ثم أضف كمية محلول أخضر المالاكيت للقارورة واخلطه جيداً .
    وزع البيئة في أنابيب اختبار معقمة في كل أنبوب 6 مل ثم كثف الأنابيب على درجة 85 ْم لمدة 50 دقيقة يفضل فحص الأنابيب بوضع أحدها في الحضان لمدة 48 ساعة خشية حدوث تلوث بها ويمكن حفظها في الثلاجة لفترة شهر .
    وتستعمل هذه البيئة لتنمية Mycobacterium tuberculosis .



    Macconkey agar

    Peptone 17 gm
    Proteose peptone 3 gm
    Lactose 10 gm
    Bile salt 1.5 gm
    NaCl 5 gm
    Agar 15 gm
    Neutral red 0.03 gm
    Crystal violet 0.001 gm
    D.water 1000 ml
    يعتبر وسط مفرق بين البكتيريا المخمرة لسكر اللاكتوز وغير المخمرة بحيث تظهر البكتيريا المخمرة للاكتوز مستعمرات وردية بينما غير المخمرة تظهر مستعمرات شفافة وهذه البيئة تظهر البكتيريا المعوية coli form . يمكن زيادة 3.5 جم للبيئة لمنع انتشار بكتيريا Proteus .

    Sensitivity test agar ( Muller – Hinton )

    Pancreatic digest of casien 2 gm
    Peptic of animal tissue 7 gm
    Veal infusion 9 gm
    Dextrose 10 gm
    NaCl 3 gm
    Disodium phosphate 2 gm
    Sodium acitate 1 gm
    Adinine sulfate 0.01 gm
    Guanine 0.01 gm
    Uracil 0.01 gm
    Xanthine 0.01 gm
    Agar 14 gm
    Ph = 7.3
    تستعمل هذه البيئة لفحص حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية .

    CLED Medium ( Mackey & Sandys )
    The cystine – lactose – electrolytes – deficient medium

    Peptone 4 gm
    Beef extract 3 gm
    Tryptone 4 gm
    Lactose 10 gm
    L-cystine 0.128 gm
    Bromothymol blue 0.2 gm
    D.water 1000 ml
    Ph = 7.3
    تعطي هذه البيئة الصفات التالية لكل نوع من البكتيريا :
    E.coli : مستعمرات صفراء معتمة وتظهر سلالات الـ E.coli غير المخمرة للاكتوز زرقاء اللون .
    Klebsiella : مستعمرات مخاطية بلون أصفر- أبيض مزرق .
    Proteus : مستعمرات زرقاء أصغر من بعض سلالات الـ E.coli.
    Salmonella : مستعمرات زرقاء منبسطة .
    Pseudomonas pyocyaneae : مستعمرات خضراء .
    Streptococcus fecalis : مستعمرات صفراء بقطر 0.5 ملم .
    Staphylococcus aureus : مستعمرات صفراء داكنة بقطر 0.75 ملم .
    Coagulase Ve- Staph. :مستعمرات بيضاء معتمة أو صفراء قاتمة ذات حافة شاحبة .
    Diphtheroids : مستعمرات رمادية صغيرة جداً .
    Lactobacilli : مستعمرات صغيرة جداً رمادية ذات سطح خشن .

    بيئة آجار المصل والدكستروز Serum dextrose agar
    ببتون 10 جم
    مستخلص لحم 5 جم
    كلوريد صوديوم 5 جم
    آجار 20 جم
    ماء مقطر 1 لتر
    يعقم بالأوتوكليف ثم يترك ليبرد عند 56 ْم ثم يضاف 5 ملل من المصل المعقم بالترشيح ويحتوي على 20 % ديكستروز إلى 95 ملل من المكونات السابقة ثم تضاف المضادات الحيوية التالية إلى المكونات السابقة ( 1000 ملل من البيئة المحتوية على المصل ) :
    6000 u of polymyxin B
    25000 u of bacitracin
    100 ml.gm of actidione

    ويستخدم هذا الوسط لعزل بكتيريا البروسيلا .

    ثانيا: ملحق المحاليل والصبغات المستخدمة


    محلول كحولي للتعقيم :
    يحضر بإضافة 70 ملل من الكحول الإيثيلي إلى 30 ملل من الماء المقطر فيصبح تركيزه 70 % .

    محلول اليود لتعقيم الأيدي :
    يسحق 2 جرام من اليود Iodine في 100 ملل من الماء المقطر.

    صبغة اليود (صبغة جرام) Iodin dye :
    يود Iodine 1 جرام
    يوديد البوتاسيوم Potasium iodide 2 جرام
    ماء مقطر 240 مل
    اضافة محلول بيكربونات الصوديوم 5 % بمقدار 60 مل

    مزيل اللون ( صبغة جرام ) Decolorizer :
    إيثانول 95 % 250 مل
    أسيتون 250 مل

    صبغة أزرق الميثيلين Methylene blue :
    مسحوق أزرق الميثيلين 0.3 جرام
    كحول إيثيلي 95% 30 ملل
    ماء مقطر 100 ملل
    أذب أزرق الميثيلين في الكحول ثم أضف الماء المقطر ورشح المحلول

    صبغة السفرانين Safranin (صبغة جرام ) :
    مسحوق السفرانين 0.25 جرام
    كحول إيثيلي 95% 10 ملل
    ماء مقطر 100 ملل
    أذب السفرانين في الكحول ثم أضف الماء المقطر ورشح .

    صبغة الكريستال البنفسجي Crystal violet أو الجنشيان البنفسجي Gentian violet ( صبغة جرام ) :

    n محلول أ
    مسحوق الكريستال البنفسجي 4 جرام
    كحول إيثيلي 95% 20 ملل
    n محلول ب
    أكسالات أمونيوم 1 جرام
    ماء مقطر 100 ملل
    خفف محلول أ عشر مرات بالماء المقطر ثم يخلط محلول أ مع محلول ب بنسبة 1 : 4 .

    صبغة ألبرت Albert stain :
    أزرق التولويدين Toluidine blue 1.5 جم
    أخضر الملاكيت Malachite green 2 جم
    حمض الخل acetic acid 10 مل
    إيثانول Ethanol 20 مل
    ماء مقطر 1000 مل
    تذاب الصبغتين بالكحول ثم يضاف الماء وحمض الخل وانتظر لمدة يوم ثم رشح .

    الصبغ بطريقة نيسر Neisser`s method :
    أزرق الميثيلين Methylene blue 1 جم
    إيثانول 95 % 50 مل
    حمض الخل Acetic acid 50 مل
    ماء مقطر 1000 مل

    صبغة لوفلير أزرق الميثيلين Loffler methylene blue stain

    Methylene blue 0.3 جم
    Ethyl alcohol 95 % 30 مل
    D.water 100 مل
    يضاف 1 لتر من محلول 0.01 % هيدروكسيد بوتاسيوم KOH إلى 300 مل من المحلول السابق .

    صبغة النجروسين Nigrosen :
    مسحوق النجروسين 1 جم
    ماء مقطر 100 ملل

    صبغة أخضر الملاكيت Malchite green :
    مسحوق أخضر الملاكيت 5 جم
    ماء مقطر 100 ملل

    صبغة السفرانين Safranin (صبغ الجراثيم ) :
    مسحوق السفرانين 5‚0 جم
    ماء مقطر 100 ملل

    صبغة الكريستال البنفسجي Crystal violet (صبغة الغلاف ) :
    كريستال بنفسجي 1 جم
    ماء مقطر 100 ملل

    محلول كبريتات النحاس (صبغة الغلاف ) :
    كبريتات النحاس 20 جم
    ماء مقطر 100 ملل

    كحول حامضي Acidic alcohol:
    كحول إيثيلي مطلق 95% 97 ملل
    حمض هيدروكلوريك مركز 3 ملل

    صبغة كربول الفوكسين Carbol fuchsin للصبغ المقاوم للأحماض:

    n محلول أ
    فوكسين قاعدي 0.3 جم
    إيثانول 95% 10 ملل
    n محلول ب
    فينول 5 جم
    ماء مقطر 100 ملل
    اخلط المحلولين أ و ب معاً مع أخذ الحذر ويفضل الترشيح قبل الإستخدام .

    صبغة أحمر الكونغو Congo red :
    مسحوق أحمر الكونغو 3 جم
    ماء مقطر 100 ملل

    صبغة الروز بنغال Rose bengal :
    مسحوق الروز بنغال 1 جم
    ماء مقطر 150 ملل


    صبغة الإرثروسين :
    ارثروسين 1 جم
    محلول فينول 5 % 100 مل
    كلوريد كالسيوم 0.05 جم


    صبغة الأسواط :
    محلول ( أ )
    حمض تانيك 4 جم
    كلوريد حديديك 1.5 جم
    ماء مقطر 100 مل
    اخلط المكونات السابقة ثم أضف إليها المكونات التالية
    هيدروكسيد صوديوم 1 % 1 مل
    فورمالين 40 % 2 مل
    محلول ( ب )
    نترات فضة 2 جم
    ماء مقطر 100 مل
    أذب نترات الفضة ثم احتفظ بـ 10 مل ثم أضف إلى الـ 90 مل الباقية هيدروكسيد الأمونيوم نقطة نقطة حتى يتكون راسب .
    استمر في إضافة هيدروكسيد الأمونيوم نقطة نقطة حتى يزول الراسب ثم توقف عن الإضافة .
    ثم أضف محلول نترات الفضة ( 10 مل المحتفظ بها ) إلى المحلول الرئيسي نقطة نقطة حتى تتكون عكارة خفيفة . اختبر الـ Ph واضبطه عند 9.8 – 10 .
    يجب إجراء عملية الصبغ خلال 4 ساعات من تجهيز الصبغة .

    صبغة فونتانا :
    مثبت فونتانا
    حمض خليك ثلجي 1 مل
    فورمالين 2 مل
    ماء مقطر 100 مل
    معمق فونتانا
    حمض تانيك 5 جم
    ماء مقطر 100 مل
    محلول فضة فونتانا
    1- يذاب 5 جم نترات فضة في 100 مل ماء مقطر .
    2- خفف 5 مل من محلول أمونيا مركزة بـ 45 مل ماء مقطر .
    3- خذ 90 مل من محلول نترات الفضة وأضف إليه 25 مل من محلول مخفف من الأمونيا
    4- استمر في إضافة الأمونيا نقطة نقطة حتى يذوب الراسب المتكون .
    5- أضف محلول نترات الفضة ( 10 مل المحتفظ بها ) إلى المحلول الرئيسي نقطة نقطة حتى تتكون عكارة خفيفة .

    محلول أحمر الميثايل Methyl red:
    أحمر الميثايل 0.1 جم
    كحول إيثيلي مطلق 250 مل
    ماء مقطر 250 مل
    أذب أحمر الميثايل في الكحول ثم أضف إليه الماء ورشح .

    محلول ألفانافثايل أمين :
    ألفانافثيل أمين 5 مل
    حامض كبريتيك مركز 8 مل
    ماء مقطر 1 لتر
    أضف حامض الكبريتيك المركز إلى الماء المقطر ثم أضف الألفانافثيل أمين وقلب حتى يتم الذوبان .

    محلول باريت ( أ )
    ألفانافثول 6 جم
    كحول إيثيلي مطلق 100 مل

    محلول باريت ( ب )
    هيدروكسيد بوتاسيوم 16 جم
    ماء مقطر 100 مل

    حمض بوريك 0.2 جزيئي
    بللورات حمض بوريك 12.4 جم
    يكمل المحلول بالماء المقطر إلى 1 لتر

    حمض ستريك 0.1 جزيئي
    حمض ستريك 21 جم
    يكمل المحلول بالماء المقطر إلى 1 لتر

    حمض سلفانيليك
    حمض سلفانيليك 8 جم
    حمض كبريتيك مركز 48 مل
    يكمل المحلول بالماء المقطر إلى 1 لتر
    أضف حمض الكبريتيك إلى 500 مل ماء مقطر ثم أضف حمض السلفانيليك ثم الماء المقطر ليصل الحجم إلى 1000 مل .

    فوسفات ثنائي البوتاسيوم 0.2 جزيئي
    فوسفات ثنائي البوتاسيوم 34.9 جم
    يكمل المحلول بالماء المقطر إلى 1 لتر

    محلول كوفاك
    بارا داي ميثايل أمينو بنزالدهيد 5 جم
    كحول إيثايل أو بيوتايل 75 مل
    حمض هيدروكلوريك مركز 25 جم
    أذب المادة الأولى في الكحول ثم أضف الحمض .

    مزيج فاسبار
    فازلين 1 جزء
    شمع بارافين 1 جزء
    يسخن حتى تنصهر المادتين .

    مزيج هضم البروتينات
    حمض كبريتيك مركز 500 مل
    كبريتات صوديوم 75 جم
    سيلينايت النحاس 2 جم
    ماء مقطر 500 مل


    منظم فوسفاتي
    محلول ( أ )
    فوسفات أحادي البوتاسيوم 0.91 جم
    ماء مقطر 100 مل
    محلول ( ب )
    فوسفات ثنائي الصوديوم 0.95 جم
    ماء مقطر 100 مل
    اخلط 61.1 مل من المحلول ب مع 38.9 مل من المحلول أ .

    صبغة ليشمان Lieshman stain
    تباع كصبغة محضرة وجاهزة إلا أنه من الممكن تحضيرها كما يلي :
    تسخن صبغة أزرق الميثيلين ( 2 جم ) مع كربونات الصوديوم 5 % ( 100 ملل ) ثم يترك ليبرد ويضاف له 50 مل من محلول صبغة الإيوسين . وعند الترسيب يؤخذ الراسب ويذاب في كحول ميثيلي .

    صبغة جيمسا Giemsa stain
    تباع جاهزة ويمكن تحضيرها كما يلي :
    جليسرول 25 ملل
    أسيتون مطلق 25 ملل
    مسحوق صبغة جيمسا 0.3 جم


    محلول تنظيف الأدوات الزجاجية :
    ثنائي كرومات الصوديوم 25 جم
    حمض كبريتيك مركز 1 لتر
    ماء مقطر 50 ملل



جاري المعالجة..
X
😀
😂
🥰
😘
🤢
😎
😞
😡
👍
👎